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聯(lián)系我時(shí),請告知來(lái)自 紡織服裝機械網(wǎng)“兩蟲(chóng)"(賈第鞭毛蟲(chóng)、隱孢子蟲(chóng))檢測賈第鞭毛蟲(chóng)是感染小腸的雙核鞭毛原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)
“兩蟲(chóng)" (賈第鞭毛蟲(chóng)、隱孢子蟲(chóng))檢測
賈第鞭毛蟲(chóng)是感染小腸的雙核鞭毛原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)。感染通常會(huì )導致慢性虛弱的腹瀉,體重減輕和吸收不良。飲用被污染的水可能會(huì )導致賈第鞭毛蟲(chóng)病。傳播也通過(guò)直接接觸而發(fā)生,尤其是與無(wú)癥狀的攜帶者接觸以及食物污染。高風(fēng)險類(lèi)別包括幼兒,免疫功能低下的患者以及以前沒(méi)有接觸過(guò)的患者。
隱孢子蟲(chóng)是脊椎動(dòng)物的原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)。在世界. 上大多數地區,它與腹瀉病有關(guān),是旅行者腹瀉的常見(jiàn)原因。該疾病是由厚壁卵囊傳播的,該卵囊對普通消毒劑和飲用水的常規氯化反應具有顯著(zhù)抵抗力。人與人之間的傳播很普遍。隱孢子蟲(chóng)病是獲得性免疫缺陷綜合癥患者的一一種嚴重機會(huì )性感染。臨床表現包括腹瀉,腹痛,,嘔吐和體重減輕。在健康人中, 感染通常是自限性的。
在艾滋病和免疫抑制患者中,該病可能會(huì )持續時(shí)間延長(cháng)并可能會(huì )危及生命。目前“兩蟲(chóng)"已被列入國標GB/T 5749- 2006非常規檢測項目。國標GB/T 5750-2006中檢測方法源于EPA1623。方法流程為水樣過(guò)濾淘洗、免疫磁分離、熒光染色和鏡檢。在水樣的過(guò)濾淘洗步驟中,國標描述了三種方法可選,其中Envirochek過(guò)濾淘洗方法為仲裁法。
北京格維恩科技有限公司作為PALL“兩蟲(chóng)"檢測產(chǎn)品(Envirochek濾器、 多樣品洗脫振蕩器及試劑)國內總代理,十幾年來(lái)與國內疾控、環(huán)保、水務(wù)、第三方檢測、食藥監、海關(guān)、高校及研究院合作開(kāi)展“兩蟲(chóng)"檢測項目,客戶(hù)數量過(guò)百家。同時(shí)提供EPA1623.1方法(2012年改進(jìn)版本、針對含有磁性物質(zhì)的復雜水樣顯著(zhù)提高回收率)供客戶(hù)選擇。
水樣過(guò)濾易于使用。無(wú)需組裝或清潔過(guò)濾器架或洗脫設備。
可同時(shí)處理多份樣品,節省時(shí)間。
一次性成品,可避免交叉污染和假陽(yáng)性結果。
一般能夠回收70%以_ 上的靶標生物。
濾膜孔徑小至1 um,能夠保留隱孢子蟲(chóng)和賈地鞭毛蟲(chóng)。
所有EnvirochekHV囊式采樣濾器均經(jīng)過(guò)完整性試驗。
使用安全。無(wú)需處理或拆分可能受到污染的濾芯。
各囊式濾器均分別帶有序列號,便于追溯。
Envirochek囊式采樣濾器已獲美國EPA方法1622和1623.1確認與注冊。
Envirochek HV囊式采樣濾器專(zhuān)用于1,000 L或更多凈化水,經(jīng)確認可用于50 L源水。
Envirochek HV囊式采樣濾器(產(chǎn) 品編號: 12096和12097) 通過(guò)了英國DWI成品水監管測試。
Envirochek囊式采樣濾器已在ISO/DIS 15553-2006中注冊。
水樣淘洗:PALL專(zhuān)用的洗脫振蕩器可以同時(shí)洗脫8個(gè)樣品,15分鐘即可完成。設備操作簡(jiǎn)單,不需要維護、清洗、消毒及額外的輔助設備如氣泵等。設備可靠性強,正常使用情況下,三年內儀器出現硬件問(wèn)題免費換新。
免疫磁分離IMS:利用DynalBead帶有特異性的“ 兩蟲(chóng)"抗體磁珠與樣本中目標蟲(chóng)體抗原結合從而高效選擇性分離。
染色鏡檢利用BTF生產(chǎn)的Easystain染色試劑盒,內含配制好的FIFC及DAPI染液及配套試劑,無(wú)需復染,染色效果、操作簡(jiǎn)單。鏡檢配置專(zhuān)用的研究級正置熒光顯微鏡,同時(shí)擁高像素圖像采集系統。圖像清晰,可保存。熒光模塊、物鏡等均可拓展。滿(mǎn)足客戶(hù)多種需求。
“兩蟲(chóng)"檢測方法及系統介紹
我公司推薦使用的Envirochek“兩蟲(chóng)"檢測方法是GB5749-2006國標和GB/T5750-2006《生活飲用水標準監測方法》中測定生活飲用水和水源水中賈第鞭毛蟲(chóng)和隱孢子蟲(chóng)的方法,也是GB/T5750-2006國標規定的兩蟲(chóng)檢測的仲裁法,同時(shí)也是美國EPA制定的測定水中賈第鞭毛蟲(chóng)和隱孢子蟲(chóng)的標準方法EPA1623 (EPA-821-R-99-66)。
賈第鞭毛蟲(chóng)、隱孢子蟲(chóng)簡(jiǎn)述
1. 隱孢子蟲(chóng)的生活史
隱孢子蟲(chóng)(Cryptosporidium)是一種寄生性的原生動(dòng)物,其中感染人的是微小隱孢子蟲(chóng)C. parvum。
隱孢子蟲(chóng)的卵囊呈圓形,直徑約4~6微米,成熟卵囊內含4個(gè)呈月牙形的子孢子和呈顆粒物狀的殘留體。
隱孢子蟲(chóng)的生活周期包括無(wú)性生殖、有性生殖和孢子生殖三個(gè)階段,可在同一宿主體內完成。隨宿主糞便排出的卵囊(oocyts)具有感染性,新宿主吞食了存在于水中的卵囊就會(huì )感染隱孢子蟲(chóng)病。隱孢子蟲(chóng)整個(gè)生活周期約需5~11天。
2. 賈第鞭毛蟲(chóng)的生活史
賈第氏鞭毛蟲(chóng)(Giardia)是一種寄生性的原生動(dòng)物,感染人的是腸賈第鞭毛蟲(chóng)G.intestinalis。
孢囊呈橢圓形,長(cháng)約8~18微米,寬約5~15微米,未成熟的孢囊有2個(gè)核,成熟的孢囊具4個(gè)核。
其生活史由孢囊和滋養體兩個(gè)不同的發(fā)育階段組成。
由于賈第鞭毛蟲(chóng)和隱孢子蟲(chóng)卵囊和孢囊的表面包裹著(zhù)一層較厚的囊壁,因此具有非常強的環(huán)境抗性。常規消毒工藝的氯濃度不能有效滅活隱孢子蟲(chóng)和賈第鞭毛蟲(chóng),它們通過(guò)水廠(chǎng)構筑物進(jìn)入供水管網(wǎng),威脅人們健康。傳統檢測手段有嚴重的滯后性,不能及時(shí)準確的報告水中有關(guān)兩蟲(chóng)的信息。
3. 兩蟲(chóng)的危害
隱孢子蟲(chóng)和賈第鞭毛蟲(chóng)產(chǎn)生的卵囊和孢囊對環(huán)境有很大的抗性,人體只要攝入幾個(gè)就會(huì )生病。
賈第鞭毛蟲(chóng)致病劑量為10~100個(gè)活孢囊,隱孢子蟲(chóng)致病劑量?jì)H為1~10個(gè)活卵囊。
主要感染方式:主要通過(guò)患病動(dòng)物糞便中的卵囊污染食物和飲用水而感染人畜。
主要易感人群為:兒童、老人或免疫力低下的人群。
發(fā)病癥狀:頭暈、、腹痛、嘔吐、腹瀉、低燒甚至死亡等。
1993年美國Wisconsim州Milwaukee市兩蟲(chóng)污染事件導致了約40萬(wàn)人受到感染,其中160多人死亡。
1998年夏,悉尼自來(lái)水公司在管網(wǎng)中檢出了高濃度的孢囊和卵囊,要求用戶(hù)將水煮沸后飲用,持續時(shí)間長(cháng)達35天。
1997年美國對各水廠(chǎng)原水的月度調查表明:卵囊的高陽(yáng)性檢出率為10.4%,孢囊的高陽(yáng)性檢出率為31.3%。
德國有83%的水樣中檢測出有兩蟲(chóng),馬來(lái)西亞有90%檢出,香港有99%檢出,甚至在濾后水中也檢測出兩蟲(chóng)。
美國國家于1997年7月~1998年12月調查結果顯示,4.62%~10.43%的水廠(chǎng)原水中有隱孢子蟲(chóng),而13.6%~31.25%的水廠(chǎng)原水中有賈第鞭毛蟲(chóng)。在亞洲、非洲及拉丁美洲,每年有2.5~5億人次受到兩蟲(chóng)感染。
“EPA1623方法"概述
1. 美國EPA于1996年12月起草,于1999年1月修正并通過(guò)測定隱孢子蟲(chóng)的1622(EPA-821-R-99-001)方法,在此基礎上能同時(shí)測定隱孢子蟲(chóng)和賈第鞭毛蟲(chóng)的1623 (EPA-821-R-99-66)方法于1999年4月被批準進(jìn)行樣本分析。
2. EPA1623 方法中主要推薦并在實(shí)驗中采用的是Pall公司的Envirochek濾器。
3. 為了保障飲用水安全,實(shí)施優(yōu)質(zhì)供水,國家建設部在2005年6月1日正式實(shí)施的《城市供水水質(zhì)標準》(CJ/T 206-2005)中增加了賈第鞭毛蟲(chóng)和隱孢子蟲(chóng)的微生物指標。要求:<1個(gè)/10升水。
4. 在2006年12月29日發(fā)布的《生活飲用水衛生標準》(GB 5749-2006)中增加了賈第鞭毛蟲(chóng)和隱孢子蟲(chóng)的微生物指標。要求:<1個(gè)/10升水。在實(shí)驗方法的淘洗/濃縮部分,首先推薦了Envirochek方法(Pall公司),供選的還有Filta-Max方法和Filta-MaxXpress快速法。
5. Envirochek方法(Pall公司)作為國標的方法,同時(shí)也是國標規定的仲裁方法。
6. 為了完成國標的檢測要求,開(kāi)展行之有效的“兩蟲(chóng)"檢測工作,建立“兩蟲(chóng)"檢測實(shí)驗室勢在必行。我國一些供水企業(yè)和研究部門(mén)已經(jīng)開(kāi)始了這方面的工作。
7. 目前國內已經(jīng)建立“兩蟲(chóng)"檢測系統的城市有天津、太原、深圳、東營(yíng)、北京、大慶、南京、昆明、濟南、廈門(mén)、重慶、中山、廣州、青島、杭州、佛山、南寧、成都、株洲、上海、無(wú)錫、長(cháng)沙等等,其中除廣深等早期自建實(shí)驗室之外,其余90%以上的“兩蟲(chóng)"檢測系統均是由北京格維恩公司和廣州格維恩公司設計實(shí)施的。
“EPA1623方法"內容簡(jiǎn)述
一、方法概述
1. 本方案是通過(guò)對過(guò)濾、免疫磁分離(IMS)和免疫檢驗化驗(FA)顯微鏡等方法來(lái)確定水中的隱孢子蟲(chóng)(CAS登記號137259-0-8)和賈第鞭毛蟲(chóng)(CAS登記號137259-49-5)的特性與濃度,隱孢子蟲(chóng)和賈第鞭毛蟲(chóng)可以通過(guò)4',6-Diamidino-Phenylindole(DAPI)著(zhù)色和差分干涉相襯(DIC)顯微鏡檢驗法進(jìn)行確定。本方案經(jīng)批準可用于地表水,但如果實(shí)驗室證明符合該方案執行驗收標準,也可以用于其它水樣。
2. 本方案符合美國調查和探測標準,通過(guò)了美國EPA認證。本方案以的專(zhuān)家團所提供的實(shí)驗室試驗為基礎。專(zhuān)家團負責提供一種用于回收與探測原生動(dòng)物改進(jìn)草案,能夠通過(guò)最小的附加研究來(lái)檢測和實(shí)現。
3. 本方案不用于鑒定隱孢子蟲(chóng)或賈第鞭毛蟲(chóng)種類(lèi)或其它原寄主種類(lèi),也不能確定探測到的卵囊和包囊的活性及其侵染性。
4. 本方案應由精于通過(guò)過(guò)濾,免疫磁分離和免疫檢驗化驗對隱孢子蟲(chóng)和賈第鞭毛蟲(chóng)進(jìn)行探測的人員使用。第22.2部分把這類(lèi)人定義為分析員。不熟悉通過(guò)本方案技術(shù)對環(huán)境樣本進(jìn)行分析的試驗室應獲得使用水樣過(guò)濾技術(shù)、免疫磁分離和單克隆抗體熒光抗體著(zhù)色,利用明場(chǎng)和差分干涉相襯(DIC)顯微鏡檢驗法對生物微粒微觀(guān)檢驗的技術(shù)。
二、主要實(shí)驗環(huán)節
1. 通過(guò)水樣過(guò)濾,把卵囊、包囊和外來(lái)物質(zhì)留在過(guò)濾器上。
2. 洗脫與分離
2.1 過(guò)濾器上的物質(zhì)經(jīng)過(guò)洗脫,洗脫物通過(guò)離心分離作用使卵囊和包囊成為球形,同時(shí)分離出的上清液被吸取。
2.2 卵囊和包囊被與抗隱孢子蟲(chóng)和抗賈第鞭毛蟲(chóng)抗體結合的磁珠附加裝置磁化。通過(guò)使用磁體,磁化后的卵囊和包囊從其它物質(zhì)中分離,其它物質(zhì)被清除。接著(zhù),磁珠聯(lián)合體從卵囊和包囊中分離。
3. 計數
3.1 卵囊和包囊在穴槽載玻片上被磁熒光標記的單性抗體和4',6-Diamidino-Phenylindole(DAPI)溶液著(zhù)色。用熒光和差分干涉相襯(DIC)顯微鏡檢驗法對著(zhù)色樣本進(jìn)行檢驗。
3.2 通過(guò)仔細觀(guān)察每一個(gè)載玻片,對符合隱孢子蟲(chóng)卵囊和包囊大小,外形和熒光特性的對象進(jìn)行定性分析。
3.3 通過(guò)計算載玻片上被確定為卵囊和包囊的對象來(lái)進(jìn)行定性分析。
3.4 通過(guò)使用再現校準和過(guò)濾,免疫磁分離,著(zhù)色和顯微鏡檢驗系統來(lái)保證質(zhì)量。
(以上流程詳見(jiàn)附件“隱孢子蟲(chóng)和賈第鞭毛蟲(chóng)檢測方法講稿")
本系統采用《生活飲用水標準檢驗方法》GB/T 5750.12-2006,
同時(shí)也符合美國EPA第1622和1623號方法,
英國DWI(飲用水監察署)第1524號方法,
ISO(國際標準化組織)第15553號方法。
Envirochek®及Envirochek HV膠囊式取樣過(guò)濾器
用于從水源水或成品水中濃縮、回收隱孢子蟲(chóng)卵囊和賈第鞭毛蟲(chóng)孢囊
簡(jiǎn)單易用,過(guò)濾支架或洗提裝置無(wú)需裝配,也無(wú)需清洗。
可同時(shí)處理多個(gè)樣本,從而節約時(shí)間。
一次性使用的設計,消除交叉污染導致的假陽(yáng)性可能。
對于目標有機體的回收率通常高于70%。
利用孔徑為1μm的濾膜,99%截留收集隱孢子蟲(chóng)和賈第鞭毛蟲(chóng),從而消除了假陰性可能。
更高的使用安全性。作為自主式膠囊式過(guò)濾器,意味著(zhù)過(guò)濾元件無(wú)需處理,也不需分割。
序列編碼,以供追蹤。
Envirochek HV膠囊式過(guò)濾器均已通過(guò)完整性測試。
應用:Envirochek膠囊式取樣過(guò)濾器
有效過(guò)濾面積:1,300 cm2
外形尺寸
長(cháng)度:21.6厘米(8.5英寸)
直徑:6.1厘米(2.4英寸)
入口/出口連接
12.7 mm (1/2 in.) 倒刺直軟管
洗提能力
下限為127mL
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