一、公司簡(jiǎn)介
Reichert總部位于美國布法羅市,是一家極其卓絕并創(chuàng )新性的高科技企業(yè)。具有170余年研 發(fā)、設計及生產(chǎn)高級
光學(xué)儀器及分析儀器的歷史與經(jīng)驗,并在過(guò)去20年里給生命科學(xué)和藥物 研發(fā)等領(lǐng)域用戶(hù)提供靈敏和穩健的
表面等離子體(Surface Plasmon Resonance, SPR)儀 器。僅在過(guò)去10年,采用Reichert公司SPR技術(shù)發(fā)表的高質(zhì)
量文獻多達數百篇。Reichert生命科 學(xué)業(yè)務(wù)部將繼續研發(fā)并生產(chǎn)靈敏準確、性?xún)r(jià)比高的SPR系統,使研究
者可以探索并超越 分子間相互作用非標記檢測的極限。
Reichert總部位于美國紐約州布法羅市
獲取數據信息
圖1.Reichert SPR技術(shù)獲取數據信息
應用領(lǐng)域 - 濃度測定:可測定生物活性分子(蛋白、抗體、細胞因子、生物標志物等)及(小分子化合物、農藥殘留、毒素等)準確濃度
- 是否結合(Yes/No):可快速判斷分子間是否存在結合
- 親和力測定(KD):可準確測定分子間從mM到pM范圍親和力
- 動(dòng)力學(xué)測定(KD, Ka, Kd) :通過(guò)實(shí)時(shí)動(dòng)力學(xué)方式提供分子間結合快慢信息,除了提供親和力信息外,還可呈現結合常數和解離常數
- 熱動(dòng)力學(xué)分析( △H,△S):熱動(dòng)力學(xué)分析可提供分子間結合深層次機理,判斷焓驅動(dòng)或熵驅動(dòng)結合,有助于藥物創(chuàng )新設計
應用類(lèi)型 - 蛋白-蛋白/核酸/糖/脂/小分子相互作用
- 完整細胞-分子相互作用
- 抗體-抗原相互作用
- 抗體篩選,表位篩選
- 疫苗、納米材料、聚合物
- 脂質(zhì)體(Liposome)、外泌體(exosomes)、病毒、病毒樣顆粒(VLPs)
- 熱動(dòng)力學(xué)分析 (△H & △S)
- 活性濃度分析
樣品類(lèi)型 - 常規樣品:如蛋白、核酸、小分子、細胞上清、細胞裂解液上清等
- 完整細胞:可研究蛋白與完整原核及真核細胞、以及膜性成分(包括細胞膜)之間相互作用
- 血液:直接檢測血液樣品,減少處理步驟,排除純化過(guò)程對樣品的影響
- 細胞裂解液、噬菌體、膠體金顆粒、納米材料等
應用案例
圖2. 大分子相互作用(HSA與anti-HSA相互 圖3. 小分子相互作用(CAII與95Da小分 作用) 子Methanesulfonamide相互作用) kon=1.77×105M-1s-1,koff=1.17×10-3s-1, kon = 3.92 ×102 M-1s-1,
KD=6.62nM koff = 2.56×10-1 s-1,KD = 652 μM
圖4. SPR-熒光顯微鏡聯(lián)用(HEK細胞與纖維 圖5. DNA( T-bulge)與鋅指復合物相互作用 原蛋白相互作用) kon=4.68×103M-1s-1, kon1 = 2.4 ×103 M-1s-1,koff1 = 8.5×10-3 s-1, koff=1.7×10-1s-1,
KD1 = 3.54 μM;kon2 = 9.7×103 M-1s-1, KD=36.4μM koff2 = 2.5×10-4 s-1,KD2 = 26.4 nM
圖6. 植物蛋白相互作用(植物蛋白TWD1 圖7. 酶抑制劑的熱動(dòng)力學(xué)研究(4-CBS與 與生長(cháng)素轉運抑制劑NPA相互作用) CAII在20℃(藍線(xiàn))及35℃(紅線(xiàn))結合
KD=105μM 的溫度依賴(lài)信號曲線(xiàn),ΔH為-6.0kcal/mol 。
圖8. 納米顆粒相互作用(納米金顆粒修 圖9. 納米顆粒相互作用(AP1修飾的
飾的多肽與其抗體相互作用) 納米籠狀顆粒與IL-4的相互作用)
kon=6.9×106M-1s-1 kon=5.25×105M-1s-1 koff=1.55×10-4s-1,
KD=0.30nM
圖10. SPR-電化學(xué)聯(lián)用(電壓對標 圖11. 化學(xué)溶液研究(CaCl2溶液對羧甲基
記的短肽與鏈霉親和素相互作用的影響) 纖維素吸附的影響)
圖12A. 細菌相互作用(通過(guò)細菌特異 圖12B. 細菌相互作用(分析菌落生長(cháng)數)
性抗體捕獲細菌)
直觀(guān)易用的軟件
- 數據分析處理:動(dòng)力學(xué)分析曲線(xiàn)擬合至少5種模型可選:1:1model,1:2model,2:1model, mass transport model,2-state model等
- 數據分析可采用結合速率或結合信號,實(shí)驗數據也可直接導入其他專(zhuān)業(yè)數據分析軟件如Scrubber,Clamp,TraceDrawer等,分析結果支持多種輸出格式,Excel,JEPG等
- 數據采集和顯示:數據采集軟件可用于實(shí)驗方法創(chuàng )建、保存和運行,并能自動(dòng)化控制檢測模塊、進(jìn)樣器、注射泵等,可自行計算非常規溶劑或現行緩沖液的溫度系數,精確控制樣品倉溫度和樣品檢測溫度,實(shí)現長(cháng)時(shí)間無(wú)人值守自動(dòng)化檢測,按照實(shí)驗要求完成熱動(dòng)力學(xué)檢測等,檢測過(guò)程中實(shí)時(shí)顯示所有步驟曲線(xiàn)
- 支持監管法規環(huán)境,符合GxP和21 CFR Part 11
種類(lèi)豐富的各種芯片 - 傳感器芯片:≥12種,包括裸金芯片、固定化ligand芯片、固定脂質(zhì)體的芯片、捕獲細胞的芯片、特殊的捕獲芯片以及客戶(hù)自定義芯片
- 具有捕獲標記的SA芯片和對應試劑盒
- 捕獲帶His標簽蛋白的NTA芯片
- 具有捕獲細胞的芯片
靈敏度高,數據可靠 ReichertSPR可為藥物研究、藥物發(fā)現、抗體篩選、蛋白結構/功能、基因調控及系統生物學(xué)研究等提供至關(guān)重要的定量信息,可提供如下高質(zhì)量、高可信度數據:
- 嚴謹的動(dòng)力學(xué)分析,結合速率/解離速率-影響治療性候選分子適用性及劑量的生物學(xué)學(xué)位重要指標。
- 親和力范圍從極弱到(1mM到1pM)。使得研究細微和強效生物學(xué)通路以及更多療法選擇成為可能。
- 極低的噪音和基線(xiàn)漂移,噪音水平0.05μRIU(RMS),基線(xiàn)漂移0.1μRIU/分鐘。
可選擇升級特殊流路,拓展應用 - 默認配置標準流路,可滿(mǎn)足從小分子到細胞在內的大多數應用
- 采用Reichert SPR具有的特殊流路拓展應用能力:電化學(xué)流路、石英窗流路(可引入第二光源),在檢測SPR數據的同時(shí)研究興趣分子光化學(xué)變化或熒光屬性(兼容光學(xué)顯微鏡)、質(zhì)譜流路(用于鑒定結合到芯片表面的分子)。
應用 - 電化學(xué)流路:流路中興趣分子可引發(fā)芯片表面的電化學(xué)變化,記錄SPR信號數據的同時(shí)進(jìn)行SPR/電流分析、SPR/脈沖伏安法、SPR/循環(huán)伏安法,并可檢測聚合物的形成和其他新的應用
- 光化學(xué)/熒光流路:引入第二光源,在檢測SPR數據的同時(shí)研究興趣分子光化學(xué)變化或熒光屬性(兼容熒光顯微鏡)
- 質(zhì)譜流路(SPR-MS):用于鑒定結合到芯片表面的興趣分子