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閱讀：8發(fā)布時(shí)間：2024-9-11
色譜的由來(lái)
色譜法是一種重要的分離分析方法，它是根據不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相中具有不同的分配系統或吸附系數而實(shí)現分離。
1903年，的植物學(xué)家Tswett茨維特提出了一種分離現象，他利用石油醚提取植物中的葉綠素，將碳酸鈣裝入玻璃柱管中，然后把葉綠素的石油醚提取液倒入玻璃柱中，再利用純的石油醚進(jìn)行淋洗，這樣不同的色素按吸附順序在玻璃管內形成相應的彩色環(huán)帶，后來(lái)稱(chēng)為“色譜圖”。
色譜的分類(lèi)
按兩相的物理狀態(tài)可分為：氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。氣相色譜法適用于分離揮發(fā)性化合物。GC 根據固定相不同又可分為氣固色譜法(GSC)和氣液色譜法(GLC)，其中以 GLC 應用。液相色譜法適用于分離低揮發(fā)性或非揮發(fā)性、熱穩定性差的物質(zhì)。LC同樣可分為液固色譜法(LSC)和液液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體色譜法(SFC)，它以超臨界流體（界于氣體和液體之間的一種物相）為流動(dòng)相（常用 CO2），因其擴散系數大，能很快達到平衡，故分析時(shí)間短，特別適用于手性化合物的拆分。
按原理分為吸附色譜法(AC)、分配色譜法(DC)、離子交換色譜法(IEC)、排阻色譜法(EC，又稱(chēng)分子篩、凝膠過(guò)濾(GFC)、凝膠滲透色譜法(GPC）和親和色譜法，此外還有電泳。按操作形式可分為紙色譜法(PC)、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法。
色譜法的原理
色譜法的分離原理是：溶于流動(dòng)相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相(stationary phase)發(fā)生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。
色譜的發(fā)展及應用
液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長(cháng)（常有幾個(gè)小時(shí)）。
高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上，于 60 年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì )引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱(chēng)高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也稱(chēng)現代液相色譜。
HPLC的優(yōu)點(diǎn)
高效液相色譜儀（HPLC）作為有機化學(xué)分析的重要手段之一。被廣泛用于合成化學(xué)、石油化學(xué)、生命科學(xué)、臨床化學(xué)、藥物研究、環(huán)境監測、食品檢驗及法學(xué)檢驗等領(lǐng)域。具有以下優(yōu)點(diǎn)：
（1）分辨率高于其它色譜法
（2）速度快，十幾分鐘到幾十分鐘可完成；
（3）重復性高；
（4）高效相色譜柱可反復使用；
（5）自動(dòng)化操作，分析精確度高。
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