液相色譜儀分析中,選擇流動(dòng)相時(shí)應考慮流動(dòng)相與填料的作用、純度、與檢測器的匹配、粘度、對樣品的溶解度和樣品回收等方面。
一、liu動(dòng)相與填料的作用:
流動(dòng)相應不改變填料的任何性質(zhì)。
低交聯(lián)度的離子交換樹(shù)脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機相會(huì )溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。
堿性流動(dòng)相不能用于硅膠柱系統。
酸性流動(dòng)相不能用于氧化鋁和氧化鎂等吸附劑的柱系統。
二、純度:
色譜柱的壽命與大量流動(dòng)相通過(guò)有關(guān),特別是當溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。
三、與檢測器的匹配:
當使用UVD時(shí),所用流動(dòng)相在檢測波長(cháng)下應沒(méi)有吸收或吸收很小。
當使用RID時(shí),應選擇折光系數與樣品差別較大的溶劑作流動(dòng)相,以提高靈敏度。
四、粘度:
高粘度溶劑會(huì )影響溶質(zhì)的擴散和傳質(zhì),使柱效降低,還會(huì )使柱壓增加,分離時(shí)間延長(cháng)。選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動(dòng)相。
五、對樣品的溶解度:
如果溶解度欠佳,樣品會(huì )在色譜柱內沉淀,不但影響純化分離,而且會(huì )使色譜柱惡化。
六、樣品回收:
應選用揮發(fā)性溶劑。