1 細胞系開(kāi)發(fā)的工作流程
概述
隨著(zhù)許多研究機構對生成和優(yōu)化細胞株的需要以及生物制藥市場(chǎng)的快速增長(cháng)，細胞系開(kāi)發(fā)變得越來(lái)越重要。
生成和優(yōu)化細胞系是非常重要的，因為這樣可以盡早縮短藥物的上市時(shí)間，因此在減少成本和增加利潤上有著(zhù)重要的意義。
盡管最近細胞系發(fā)展（包括儀器和目標基因整合的策略），仍然有需求和空間來(lái)進(jìn)一步提高某一個(gè)階段的工藝，其中重要的一個(gè)環(huán)節就是改善上游工藝的開(kāi)發(fā)。需求如下：
●進(jìn)一步減少克隆挑選和放大的時(shí)間
●更好的成像質(zhì)量和記錄
●更高效價(jià)的克隆
●從轉染池到克隆挑選縮短15周的時(shí)間
所有的上述需求都可以通過(guò)Cell Metric這樣的儀器管理工作流程，減少上游細胞系開(kāi)發(fā)的步驟。
工作流程
細胞系的開(kāi)發(fā)始于大批量的轉染細胞，（典型的CHO-S，下一步便是分離高表達量的重組蛋白。）
挑出高表達量的克隆有很多種方法，其中之一就是熒光標記的細胞分選（FACS）， 通過(guò)這種方法，熒光抗體與重組蛋白相結合，帶有大量熒光信號的細胞會(huì )分配到微孔板的每一個(gè)孔中來(lái)進(jìn)行下一步的實(shí)驗。
Solentim 新推出的Cell Metric儀器，提供給我們一個(gè)確定細胞系單克隆性的可選方案。對每個(gè)孔板的單個(gè)細胞克隆接種都有高清的圖像，在天單個(gè)細胞就可以清晰的鑒別出并且記錄，然后可以監測細胞株的形成。定期記錄在細胞增殖過(guò)程中每個(gè)孔板中的成像。
Figure: 接種數天后的懸浮細胞團
Figure:細胞系開(kāi)發(fā)的工作流程
2 克隆篩選
在克隆篩選方面，高質(zhì)量的成像可以幫助實(shí)驗者盡早確定單克隆并且簡(jiǎn)化工作流程。Cell Metric可以自動(dòng)的進(jìn)行克隆篩選，并且儲存一個(gè)清晰的高質(zhì)量的孔板圖片最終幫助您確定孔板中的細胞是否為單克隆。
Figure： 孔板邊緣的細胞也可以清晰的看到
Figure：接種后的單細胞圖片較早的提供了單克隆的證據
Figure：生成為觀(guān)察細胞增殖和融合的生長(cháng)曲線(xiàn)
3 產(chǎn)品
細胞系的開(kāi)發(fā)在過(guò)去五年中已經(jīng)歷了從手動(dòng)成像到自動(dòng)成像的過(guò)程，與此同時(shí)，越來(lái)越多的客戶(hù)要求保留照片作為單克隆的證據。
為了克服現有的局限性并優(yōu)化流程。 第二代的成像系統Cell Metric™ 已經(jīng)被用于世界前沿的細胞系開(kāi)發(fā)過(guò)程中。
使用Cell Metric，細胞可以在常規的培養基環(huán)境中進(jìn)行整板成像。包括帶蓋子的平底平板（384,96,24,6孔）。 Cell Metric可以自動(dòng)或者手動(dòng)將板子推到儀器中，快速的進(jìn)行整孔成像。實(shí)驗結果可以在電腦上或者通過(guò)遠程觀(guān)察軟件觀(guān)察， 得到數據包括細胞計數，菌落計數，細胞聚集和生長(cháng)曲線(xiàn)，這樣就可以很容易分析每個(gè)孔的圖像，進(jìn)而對感興趣目標孔進(jìn)行深度研究。另外Cell Metric還可以實(shí)時(shí)追蹤并以圖像的形式記錄數據，幫助您追蹤單細胞的克隆生長(cháng)率，優(yōu)化您的工作流程。
Figure：Cell Metric -克隆篩選系統
Figure：Cell Metric CLD-專(zhuān)為細胞系開(kāi)發(fā)的克隆篩選系統
Figure：Cell Metric 的軟件可以給到孔板中的細胞分布情況
Figure：Cell Metric 可以成像貼壁細胞和懸浮細胞
Cell Metric 特征
| Features of Cell Metric series | Benefits |
| 單細胞分辨率圖像 | 分液到孔板后，可以從第0天觀(guān)察，在細胞系開(kāi)發(fā)的過(guò)程中可以省去數周的亞克隆時(shí)間 |
| 在微孔板中觀(guān)察細胞 | 準確的細胞數量計算 避免了吸液的誤差，直接可視讀取，對于細胞無(wú)傷害 |
| 無(wú)傷害，無(wú)污染，無(wú)標記或者染色。 | 無(wú)限定細胞的個(gè)數，可以連續測量整個(gè)孔板內的細胞數量 沒(méi)有熒光標記，對于臨床和治療性的研究有幫助 |
| 每塊板子讀取時(shí)間＜3分鐘 | 比起手動(dòng)顯微鏡方式，更加快速和準確。 整個(gè)孔板掃描，連續性更好。 |
| 自動(dòng)聚焦孔板的每一個(gè)孔 | 連續性好，沒(méi)有任何孔的漏掃。 |
| 均勻照明孔板，孔板周?chē)埠芮逦?/span> | 高清晰度的成像，孔板邊緣無(wú)陰影和光圈，而細胞經(jīng)常容易聚集在孔板邊上。 |
| 系統與所有的SBS系列的板子相容 | 整個(gè)流程使用起來(lái)方便靈活 |
| 數據記錄細胞 | 是審計追蹤的證據 |
Cell Metric 系列型號特征
| | Cell Metric™ | Cell Metric™ CLD | Cell Metric™ rapid | |
| 成像速度 | 小于三分鐘/塊板子 | 小于三分鐘/塊板子 | 45秒鐘/塊板子 | |
| 分辨率 | 2 μm 每像素 | 2 μm 每像素 | 2.7 μm 每像素 | |
| 能否整孔成像 | 是的 | |||
| 細胞類(lèi)型 | 液體培養基中的貼壁或者懸浮細胞 | |||
| 孔板類(lèi)型 | 平底,蓋有蓋子的 SBS 標準孔板: 6, 12, 24, 48, 96, 384, 1536 wells 方形瓶(plate stacker模式不支持): T-25, T-75 (需要額外適配器), Corning RoboFlasks | |||
| 成像系統 | 明場(chǎng)成像 | |||
| 是否有溫控stacker | 沒(méi)有 | 有（10塊板子） | 不適用 | |
| 能否條碼讀取 | 可以 | |||
| 尺寸(WxDxH) | 485 x 465 x 325mm 19.1 x 18.3 x 12.8” | 650 x 465 x 500 mm | 485 x 465 x 325mm 19.1 x 18.3 x 12.8” | |
| 重量 | 33 kg, 73 lbs | 50 kg, 110 lbs | 33 kg, 73 lbs | |
| 部件號碼 | CC 1000 | CC 1060 | CC 1020 | |
| 機械臂的軟件接口 | 有 | 無(wú) | 有 | |
