液相色譜儀常規分析操作步驟及規程2024/10/25

液相色譜儀操作步驟（原文摘錄自網(wǎng)絡(luò )）：1)．過(guò)濾流動(dòng)相，根據需要選擇不同的濾膜。2)．對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。3)．打開(kāi)hplc工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動(dòng)相管道，連接檢測系統。4)．進(jìn)入hplc控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。5)．有一段時(shí)間沒(méi)用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10ml/min。6)．調

液相色譜常見(jiàn)故障的斷定及解決2024/10/25

診狀可能的原因解決方法(一)保留時(shí)間變化1.柱溫變化柱恒溫，必要時(shí)需配置恒溫箱2.等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱3.緩沖液容量不夠用25mmol/L的緩沖液4.柱污染每天沖洗柱5.柱內條件變化穩定進(jìn)樣條件,調節流動(dòng)相6.柱快達到壽命采用保護柱(二)保留時(shí)間縮短1.流速增加檢查泵,重新設定流速2.樣品超載降低樣品量3.鍵合相流失流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向4.流動(dòng)相組成變化防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀5.溫度增加柱恒溫(三)保留時(shí)間延長(cháng)1.流速下降管路泄漏,更換泵密封

液相色譜儀(hplc)的保養2024/10/25

1．HPLC的日常操作條件：溫度：10—30℃；相對濕度2．泵的保養：1)使用流動(dòng)相盡量要清潔；2)進(jìn)液處的沙芯過(guò)濾頭要經(jīng)常清洗；3)流動(dòng)相交換時(shí)要防止沉淀；4)避免泵內堵塞或有氣泡;3．進(jìn)樣器的保養：1)每次分析結束后，要反復沖洗進(jìn)樣口，防止樣品的交叉污染；4．柱的保養：1)柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強烈震動(dòng)；2)當柱子和色譜儀聯(lián)結時(shí)，閥件或管路一定要清洗干凈；3)要注意流動(dòng)相的脫氣；4)避免使用高粘度的溶劑作為流動(dòng)相；5)進(jìn)樣樣品要提純；6)嚴格控制進(jìn)樣量；7)每天分析工作結束后，要清

液相色譜儀的幾個(gè)使用問(wèn)題2024/10/25

1.色譜柱中的流動(dòng)相會(huì )排干嗎？不少做色譜分離試驗的人遇到過(guò)這樣的情形：不慎未及時(shí)補充流動(dòng)相，泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干了，HPLC系統由此而停止工作了。如此情況是否會(huì )損壞色譜柱？泵是否已將色譜柱中所有流動(dòng)相都排干了？色譜柱還能使用嗎？事實(shí)上，如果泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干，并不會(huì )造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿(mǎn)了空氣，泵也不會(huì )將空氣排入色譜柱。因為泵只能輸送液體，而不能輸送空氣。相比之下，另一個(gè)更可能發(fā)生的情況是忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣，整個(gè)色譜柱干涸的情況不太容易發(fā)生

色譜常見(jiàn)問(wèn)題問(wèn)答2024/10/25

問(wèn)：用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移，有時(shí)發(fā)生快速變化，原因何在?如何解決?答：關(guān)于漂移問(wèn)題：1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定2、流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應等3、柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長(cháng)時(shí)間的平衡關(guān)于快速變化問(wèn)題1、流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩定2、泵中有氣泡，可通過(guò)排氣等操作將氣泡趕出。3、流動(dòng)相不合適，解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內進(jìn)行適當混合問(wèn)：色質(zhì)聯(lián)用中毛細柱的選擇應注意什么問(wèn)題?答：1、柱效要

毛細管分析常見(jiàn)問(wèn)題的解決2024/10/25

一、峰丟失可能的原因及應采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器驗證。2.未接入檢測器，或檢測器不起作用，檢查設定值3.進(jìn)樣溫度太低，檢查溫度，并根據需要調整4.柱箱溫度太低，檢查溫度，并根據需要調整5.無(wú)載氣流，檢查壓力調節器，并檢查泄漏，驗證柱進(jìn)品流速6.柱斷裂，如果柱斷裂是在柱進(jìn)口端或檢測器末端，是可以補救的，切去柱斷裂部分，重新安裝二、前沿峰1.柱超載，減少進(jìn)樣量2.兩個(gè)化合物共洗脫，提高靈敏度和減少進(jìn)樣量，使溫度降低10~20度，以使峰分開(kāi)3.樣品冷凝，檢查進(jìn)樣口和柱溫，如有必要可升

氣相色譜柱的安裝2024/10/25

色譜柱的正確安裝才能保證發(fā)揮其的性能和延長(cháng)使用壽命。正確的安裝請參考以下步驟：步驟1.檢查氣體過(guò)濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等檢查氣體過(guò)濾器和進(jìn)樣墊，保證輔助氣和檢測器的用氣暢通有效。如果以前做過(guò)較臟樣品或活性較高的化合物，需要將進(jìn)樣口的襯管清洗或更換。步驟2.將螺母和密封墊裝在色譜柱上，并將色譜柱兩端要小心切平步驟3.將色譜柱連接于進(jìn)樣口上色譜柱在進(jìn)樣口中插入深度根據所使用的GC儀器不同而定。正確合適的插入能zui大可能地保證試驗結果的重現性。通常來(lái)說(shuō)，色譜柱的入口應保持在進(jìn)樣口的中下部，當進(jìn)樣針

原子吸收分光光度計火焰的基本特性2024/10/25

一、火焰的燃燒特性著(zhù)火極限，著(zhù)火溫度和燃燒速度是火焰的燃燒特性，常統稱(chēng)為火焰三要素。對于一個(gè)特點(diǎn)的燃氣和助燃氣混合氣體，只有燃氣在該混合氣體中的百分含量處于某一范圍內，燃燒才能開(kāi)始，并擴展到個(gè)混合氣體中，形成火焰。此燃氣的含量的上下限稱(chēng)為著(zhù)火極限。在著(zhù)火極限內，燃燒能夠自發(fā)地擴展到整個(gè)混合氣體的zui低溫度，稱(chēng)為著(zhù)火溫度?？扇蓟旌蠚怏w的某一點(diǎn)，其溫度一但達到著(zhù)火溫度就開(kāi)始燃燒，由于熱傳導作用，燃燒反應的混合氣的這一點(diǎn)將傳播到鄰近氣層，若初始反應產(chǎn)生的熱量除了補償由于熱傳導和輻射造成的損失外，還能

使用毛細柱分析的注意事項2024/10/25

1、無(wú)載氣通過(guò)時(shí)，柱的固定液熱分解較迅速。所安裝調試人員和培訓工程師定會(huì )對操作人員強調：在柱箱（爐）升溫前一定要先通上載氣（這與TCD操作要求相似），在柱箱冷卻后方能關(guān)載氣。2、載氣中若夾帶灰塵或其它顆粒狀物體就可能導致色譜柱迅速損壞，同時(shí)還應注意不能讓微?；蚧覊m進(jìn)入汽化室，因此在載氣進(jìn)入儀器管路前必需凈化器；3、載氣中的水分通過(guò)固定液的液膜吸附在體內表面上，將會(huì )取代或破壞固定液液膜，所以，固定液極性越強，越需要采用干燥的載氣，例如：象OV-1、SE-30、SE-54、OV-101對載氣干燥要求

色譜基礎2024/10/25

1、氣相色譜法（GC）—gaschromatography用氣體做為流動(dòng)相的色法。2、氣液色譜法（GLC）—gasliquidchromatography將固定液涂在載體上作為固定相的氣相色譜法。3、氣固色譜法（GSC）—gassolidchromatography用固體（一般指吸附劑）作固定相的氣相色譜法。4、程序升溫氣相色譜法—programmedtemperaturegaschromatography色譜柱按照預定的程序連續地或分階段地進(jìn)升溫的氣相色譜法。5、反應氣相色譜法—reactio

液相色譜柱安裝與使用說(shuō)明2024/10/25

液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成，其中液相色譜柱的正確安裝和使用，是液相色譜工作的關(guān)鍵；也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實(shí)驗數據的必經(jīng)之路。一、液相色譜柱的安裝：1、液相色譜柱的結構：a、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。柱接頭采用低死體積結構，柱接頭是兩端螺紋組件，一端是為7/16英寸外螺紋，另一端是3／16英寸的內螺紋(國內外已規范化)。7／16英寸外螺紋與1／4英寸柱管(Φ6.35mm)連接，中間放置壓壞用于密封。3／16英寸的內螺紋與1／16英寸(Φ1.57mm)的

氣相色譜常見(jiàn)故障檢查診斷2024/10/25

氣相色譜種類(lèi)很多，性能也各有差別。主要包括兩個(gè)系統。即氣路系統和電路系統。氣路系統主要有壓力表、凈化器、穩壓閥、穩流閥、轉子流量計、六通進(jìn)樣閥、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器等；電子系統包括各用電部件的穩壓電源、溫控裝置、放大線(xiàn)路、自動(dòng)進(jìn)樣和收集裝置、數據處理機和記錄儀等電子器件。要分析和判斷色譜儀的故障所在，就必須要熟悉氣相色譜的流程和氣、電路這兩大系統，特別是構成這兩個(gè)系統部件的結構、功能。色譜儀的故障是多種多樣的，而且某一故障產(chǎn)生的原因也是多方面的，必須采用部分檢查的方法，即排除法，才可能縮小故障

應該選擇什么規格的PEEK管？2024/10/25

通常在整個(gè)HPLC系統中，使用.010"ID×1/16"OD的管子是很安全的。使用.010"ID的管子，一般使用的管長(cháng)度下壓降可忽略不計，而且，該內徑連接管導致的譜帶展寬可以忽略。Upchurch該規格PEEK管顏色為自然色或藍色（1531和1531B）。用1.8mmOD的管子取代一些藥物系統中使用的含氟聚合物管子。Agilent1100系統在高壓流路中使用新的1/32"OD的管子。PEEK管還有其它尺寸，一般長(cháng)度為50′和100′。一個(gè)主要的制藥公司的獨立研究報告顯示將柱后通道由熔融石英管轉換

制備型液相色譜儀選購指南2024/10/25

制備泵P230P型恒流泵流量范圍：0.10-40.00mL/minzui高工作壓力：30MPaP270型恒流泵流量范圍：1.0-50.5mL/minzui高工作壓力：20MPaP280型恒流泵流量范圍：3-300mL/minzui高工作壓力：20MPa檢測器UV230+型紫外可見(jiàn)檢測器波長(cháng)范圍：190-720nm可配不同體積的檢測池，供制備用。UV200Ⅱ型紫外可見(jiàn)可變波長(cháng)檢測器波長(cháng)范圍：190-600nm可配不同體積的檢測池，供制備用。色譜柱提供Hypersil、Spherisorb、Sino

如何選擇保護柱2024/10/25

怎樣選擇保護柱，但又不影響分離分析？這是色譜工作者經(jīng)常提出的一個(gè)問(wèn)題。通常，在選擇保護柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。對于大部分分析工作者來(lái)說(shuō)，一只1cm長(cháng)的保護柱便能提供充分的保護作用。但是，如果樣品非常不清潔，或工作中發(fā)現要經(jīng)常更換1cm的保護柱，那么就應選擇2cm或3cm長(cháng)的保護柱。保護柱越長(cháng)，自然所裝填的色譜填料越多，則其越能避免污染物進(jìn)入分析色譜柱的機會(huì )。當然，隨著(zhù)保護柱的長(cháng)度加長(cháng)，樣品的保留時(shí)間會(huì )比使用短保護柱長(cháng)。一般來(lái)說(shuō)，保護柱的內徑與分析色譜柱的內徑相同或相當即可。保護柱的填料

如何解決色譜柱使用過(guò)程中出現的問(wèn)題2024/10/25

一、保留值與分離度重現性不好原因分析問(wèn)題原因表現不同色譜柱間差異使用期間柱變化填料、鍵合相不同柱床破壞鍵合相丟失硅膠基質(zhì)溶解強保留組分堆積堵塞保留因子(k),分離因子(a）柱效(N）保留因子(k),分離因子(a）柱效(N)保留因子(k),柱效(N)柱外效應系統差異、進(jìn)樣量大、進(jìn)樣閥與色譜柱之間、色譜柱與檢測器之間的管路太長(cháng)、檢測器流通池體積大、接頭死體積大等。柱效(N)分離效果變差流動(dòng)相組分改變流速改變溫度改變保留因子(k)，柱效變化很小保留因子(k),分離因子(a)保留因子(k),柱效變化很小

怎樣選擇色譜柱2024/10/25

現代液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。一．硅膠基質(zhì)填料：1.正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica）以及其它具有極性官能團,如胺基團（NH2,APS）和氰基團（CN,CPS）的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其它極性基團極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中各組份的極性大小，即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對比固定相低，如：正己烷（Hexane

一般選擇載氣的依據是什么？氣相色譜常用的載氣有哪些？2024/10/25

作為氣相色譜載氣的氣體，要求要化學(xué)穩定性好；純度高；價(jià)格便宜并易取得；能適合于所用的檢測器。常用的載氣有氫氣、氮氣、氬氣、氦氣、二氧化碳氣等等。

載氣為什么要凈化？應如何凈化？2024/10/25

所謂凈化，就是除去載氣中的一些有機物、微量氧，水分等雜質(zhì)，以提高載氣的純度。不純凈的氣體作載氣，可導致柱失效，樣品變化，氫焰色譜可導致基流噪音增大，熱導色譜可導致鑒定器線(xiàn)性變劣等，所以載氣必須經(jīng)過(guò)凈化。一般均采用化學(xué)處理的方法除氧，如用活性銅除氧；采用分子篩、活性碳等吸附劑除有機雜質(zhì)；采用矽膠，分子篩等吸附劑除水分。

試樣的進(jìn)樣方法有哪些？2024/10/25

色譜分離要求在zui短的時(shí)間內，以“塞子"形式打進(jìn)一定量的試樣，進(jìn)樣方法可分為：１、氣體試樣：大致進(jìn)樣方法有四種：（１）注射器進(jìn)樣，（２）量管進(jìn)樣，（３）定體積進(jìn)樣，（４）氣體自動(dòng)進(jìn)樣。一般常用注射器進(jìn)樣及氣體自動(dòng)進(jìn)樣。注射器進(jìn)樣的優(yōu)點(diǎn)是使用靈活，方法簡(jiǎn)便，但進(jìn)樣量重復性較差。氣體自動(dòng)進(jìn)樣是用定量閥進(jìn)樣，重復性好，且可自動(dòng)操作。２、液體試樣：一般用微量注射器進(jìn)樣，方法簡(jiǎn)便，進(jìn)樣迅速。也可采用定量自動(dòng)進(jìn)樣，此法進(jìn)行重復性良好。３、固體試樣：通常用溶劑將試樣溶解，然后采用和液體進(jìn)樣同樣方法進(jìn)樣。也有